Plasmide Double Nickase (h) YY1: sc-400395-NIC

YY1 (Yin Yang 1) code un facteur de transcription multifonctionnel à doigts de zinc, capable d'agir à la fois comme activateur et comme répresseur transcriptionnel, en coordonnant des programmes d'expression génique dépendants du contexte. YY1 participe au remodelage de la chromatine et à la régulation épigénétique via des interactions avec des complexes associés à Polycomb et des enzymes de modification des histones, influençant l'activité des promoteurs/activateurs (enhancers) et l'organisation 3D du génome. Il contribue à des processus cellulaires fondamentaux, notamment la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l'ADN, la différenciation et le contrôle métabolique. Une activité dérégulée de YY1 a été associée à des réseaux transcriptionnels altérés observés dans divers cancers et troubles du développement, ce qui en fait une cible largement utilisée pour étudier les mécanismes de contrôle transcriptionnel.

YY1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus YY1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de YY1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de YY1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de YY1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.