Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
XRCC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403531
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- XRCC2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico XRCC2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: XRCC2 Anticuerpo (F-4): sc-365854
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
XRCC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403531 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
XRCC2 codifica un parálogo de RAD51 que actúa en la reparación por recombinación homóloga (RH) de roturas de doble hebra del ADN, apoyando el ensamblaje y la estabilización del filamento de RAD51 durante la invasión de cadena. Esta proteína es fundamental para mantener la integridad de la horquilla de replicación y resolver el daño en el ADN derivado del estrés replicativo, con estrechas conexiones funcionales con la vía de la anemia de Fanconi y con redes más amplias de mantenimiento del genoma. La alteración de XRCC2 reduce la capacidad de RH, incrementa la inestabilidad cromosómica y aumenta la sensibilidad a agentes que generan enlaces cruzados en el ADN, lo que vincula la disfunción de XRCC2 con la predisposición al cáncer y con fenotipos relacionados con deficiencias en la reparación del ADN. Como factor central de la RH, XRCC2 se estudia con frecuencia en mecanismos de estabilidad genómica, procesos mutacionales y señalización de la respuesta al daño del ADN.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO XRCC2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen XRCC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del XRCC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de XRCC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína XRCC2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en XRCC2 para la investigación de la señalización de XRCC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de XRCC2 críticos para la función de XRCC2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de XRCC2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido XRCC2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido XRCC2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus XRCC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR XRCC2 (h) y el plásmido HDR XRCC2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología XRCC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana XRCC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.