Plasmide Double Nickase (h) XBP1: sc-400131-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) XBP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide XBP1 Double Nickase (h) et le plasmide XBP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant XBP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: XBP1 Antibody (F-4): sc-8015
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) XBP1 | sc-400131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) XBP1 | sc-400131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XBP1 (X-box binding protein 1) est un facteur de transcription à fermeture éclair leucine (bZIP) qui constitue un effecteur central de la réponse aux protéines mal repliées (UPR), en particulier en aval de la signalisation du stress du réticulum endoplasmique (RE) via l’épissage non conventionnel médié par IRE1. L’isoforme épissée de XBP1 pilote des programmes transcriptionnels qui augmentent la capacité du RE, favorisent le repliement et la sécrétion des protéines, et coordonnent la protéostasie avec le métabolisme lipidique et la différenciation cellulaire. L’activité de XBP1 est étroitement liée à la fonction des cellules sécrétoires dans les lignées immunitaires et endocrines, et influence la signalisation inflammatoire ainsi que l’adaptation métabolique en situation de stress. La dérégulation des voies dépendantes de XBP1 a été associée à des affections impliquant un stress chronique du RE, notamment en biologie des cancers, dans les mécanismes des maladies métaboliques et dans les troubles immuno‑médiés, ce qui en fait une cible couramment utilisée pour étudier les circuits d’adaptation au stress.
XBP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus XBP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de XBP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de XBP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de XBP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.