Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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WWOX Double Nickase Plasmid (h): sc-403070-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das WWOX Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- WWOX Double-Nickase-Plasmid (h) und WWOX Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf WWOX abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: WWOX: sc-374449
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
WWOX Double Nickase Plasmid (h) | sc-403070-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WWOX Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403070-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WWOX (WW-domänenhaltige Oxidoreduktase) ist ein Tumorsuppressor, der innerhalb der häufigen fragilen Stelle FRA16D kodiert ist, und fungiert als Gerüstprotein, das Signalwege an Fokalkontakten, in den Mitochondrien und im Zellkern integriert. Über seine WW-Domänen bindet WWOX prolinreiche Partner, um Apoptose, DNA-Schadensantworten und zelluläre Stresssignalwege zu modulieren; beschrieben sind Verbindungen zu p53- und TGF-β-assoziierten Signalwegen sowie zur Regulation von Transkriptionsprogrammen. Ein Verlust oder eine verminderte Expression von WWOX wird in vielen Krebsarten häufig beobachtet und ist mit genomischer Instabilität und veränderter Zellüberlebensfähigkeit verknüpft. Im Nervensystem ist eine WWOX-Fehlfunktion mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen assoziiert, was seine breite Rolle bei der Steuerung des Gleichgewichts zwischen Proliferation und Zelltod sowie der zellulären Homöostase unterstreicht.
WWOX Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des WWOX-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von WWOX abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die WWOX-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit WWOX-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.