Plásmido Doble Nickase (m) Wnt-7b: sc-423722-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Wnt-7b consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Wnt-7b (m) y el plásmido de doble nickasa Wnt-7b (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Wnt7b. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Wnt-7b | sc-423722-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Wnt-7b | sc-423722-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Wnt7b del ratón codifica Wnt-7b, un ligando glicoproteico secretado que activa la señalización Wnt para regular el patrón embrionario, la morfogénesis tisular y decisiones de destino celular específicas de cada órgano. Wnt-7b puede interactuar con receptores Frizzled/LRP para estimular la transcripción canónica dependiente de β-catenina, así como programas de señalización no canónicos que modulan la proliferación, la polaridad y la migración. En contextos de desarrollo y homeostasis tisular, la actividad de Wnt-7b se ha vinculado a interacciones epitelio–mesénquima y a la remodelación vascular, lo que la hace relevante para estudiar salidas desreguladas de la vía Wnt observadas en diversos modelos de enfermedad. La expresión alterada de Wnt7b o el “tono” de su señalización se investiga con frecuencia por su impacto en los estados de diferenciación, la dinámica de la matriz extracelular y el crosstalk de la vía con señales de factores de crecimiento e inflamatorias.
Wnt-7b El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Wnt7b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Wnt7b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Wnt7b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Wnt7b alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.