Plasmide Double Nickase (m) Wnt-7b: sc-423722-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Wnt-7b correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Wnt-7b Double Nickase (m) et le plasmide Wnt-7b Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Wnt7b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Wnt-7b | sc-423722-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Wnt-7b | sc-423722-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Wnt7b code Wnt-7b, un ligand glycoprotéique sécrété qui active la signalisation Wnt afin de réguler la mise en place des patrons embryonnaires, la morphogenèse tissulaire et des décisions de destin cellulaire spécifiques à chaque organe. Wnt-7b peut se lier aux récepteurs Frizzled/LRP pour stimuler la transcription canonique dépendante de la β-caténine, ainsi que des programmes de signalisation non canoniques qui façonnent la prolifération, la polarité et la migration. Dans les contextes du développement et de l’homéostasie tissulaire, l’activité de Wnt-7b a été associée aux interactions épithélio-mésenchymateuses et au remodelage vasculaire, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier les dérégulations des sorties de la voie Wnt observées dans divers modèles de maladie. Des modifications de l’expression de Wnt7b ou de l’intensité de son signal sont fréquemment étudiées pour leur impact sur les états de différenciation, la dynamique de la matrice extracellulaire et le dialogue entre voies avec les signaux des facteurs de croissance et de l’inflammation.
Wnt-7b Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Wnt7b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Wnt7b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Wnt7b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Wnt7b.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.