Plasmide Double Nickase (m) WISP-1: sc-423705-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) WISP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide WISP-1 Double Nickase (m) et le plasmide WISP-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Wisp1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) WISP-1 | sc-423705-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) WISP-1 | sc-423705-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Wisp1 (WISP-1 ; CCN4) code une protéine matricellulaire sécrétée qui intègre les signaux provenant de la matrice extracellulaire avec la signalisation des facteurs de croissance afin de réguler l’adhérence, la migration et la prolifération cellulaires dans les tissus murins. WISP-1 est couramment associée à la voie Wnt/β-caténine et interagit avec des voies médiées par les intégrines, qui influencent le remodelage du cytosquelette, les programmes de survie et les réponses transcriptionnelles au cours du développement et du remodelage tissulaire. Une expression altérée de WISP-1 a été associée à des réponses fibrotiques dérégulées, à une signalisation angiogénique et inflammatoire anormale, ainsi qu’au remodelage du microenvironnement tumoral dans des modèles pertinents pour le cancer. Ces propriétés font de WISP-1 une cible utile pour disséquer les interactions entre matrice extracellulaire et transduction du signal dans la biologie stromale et les processus de remodelage liés aux pathologies.
WISP-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Wisp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Wisp1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Wisp1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Wisp1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.