Plasmide Double Nickase (h) WDR68: sc-409221-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) WDR68 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide WDR68 Double Nickase (h) et le plasmide WDR68 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DCAF7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) WDR68 | sc-409221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) WDR68 | sc-409221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCAF7 (WDR68) code une protéine d’échafaudage conservée à répétitions WD, qui favorise l’assemblage de complexes de signalisation et coordonne la régulation, dépendante des kinases, de programmes transcriptionnels et développementaux. WDR68 a été impliquée dans la signalisation liée aux MAPK et dans la modulation d’événements nucléaires via des interactions avec des kinases protéiques et des régulateurs transcriptionnels, reliant ainsi des signaux extracellulaires à des changements d’expression génique. En influençant la stabilité des complexes protéiques et leur localisation subcellulaire, WDR68 contribue au contrôle de la prolifération et de la différenciation cellulaires. La dérégulation des réseaux associés à WDR68 a été étudiée dans le contexte de la signalisation liée au cancer et d’autres maladies impliquant des voies kinasiques et transcriptionnelles aberrantes.
WDR68 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DCAF7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DCAF7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DCAF7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DCAF7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.