Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) WDR5: sc-402425-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) WDR5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide WDR5 Double Nickase (h) et le plasmide WDR5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant WDR5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: WDR5 Antibody (G-9): sc-393080
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) WDR5 | sc-402425-NIC | 20 µg | $410.00 |
WDR5 (WD repeat domain 5) code une protéine d’échafaudage centrale associée à la chromatine, qui se lie à l’histone H3 et coordonne l’assemblage des complexes COMPASS/MLL responsables de la méthylation de H3K4 au niveau des promoteurs actifs. Par ces interactions, WDR5 régule des programmes transcriptionnels contrôlant la progression du cycle cellulaire, la spécification des lignages et le maintien d’états de type cellule souche ; il participe également à l’élongation transcriptionnelle par l’ARN polymérase II et à la fonction des enhancers. WDR5 prend part à un dialogue épigénétique avec l’expression génique dépendante de MYC et avec d’autres régulateurs de la chromatine qui façonnent l’accessibilité globale de la chromatine. Un dérèglement du remodelage de la chromatine lié à WDR5 et de la méthylation de H3K4 a été associé à une expression altérée de gènes du développement et à des circuits transcriptionnels oncogéniques dans divers contextes pathologiques.
WDR5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus WDR5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de WDR5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de WDR5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de WDR5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.