WDR17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414101

Descripción general

WDR17 (dominio de repeticiones WD 17) codifica una proteína prevista que contiene repeticiones WD40 y se cree que funciona como un andamio para el ensamblaje de complejos multiproteicos, facilitando interacciones proteína‑proteína reguladas en el citoplasma y en sitios asociados a membrana. Aunque sus socios moleculares aún no están completamente definidos, las proteínas con repeticiones WD suelen influir en el tráfico intracelular, la organización del citoesqueleto y la integración de señales al coordinar la ubiquitinación y otros mecanismos de control postraduccional. La expresión y la variación genética en WDR17 se han investigado en el contexto de fenotipos sensoriales y del neurodesarrollo, lo que es coherente con el papel de los andamios con repeticiones WD en la arquitectura celular especializada y en vías homeostáticas. Estas características hacen de WDR17 un objetivo útil para desentrañar el cableado de las vías en células humanas, donde las proteínas andamio modulan la localización y la estabilidad de componentes de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO WDR17 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen WDR17 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del WDR17 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de WDR17 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína WDR17.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en WDR17 para la investigación de la señalización de WDR17, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de WDR17 críticos para la función de WDR17
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de WDR17 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido WDR17 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido WDR17 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus WDR17. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR WDR17 (h) y el plásmido HDR WDR17 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología WDR17 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana WDR17 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.