Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
VHL Antibody (VHL40): sc-135657. Near-infrared western blot analysis of VHL expression in Hep G2 (A), Raji (B), U-251-MG (C) and Ramos (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Von Hippel Lindau/VHL双切口酶质粒(h): sc-400528-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Von Hippel Lindau/VHL 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Von Hippel Lindau/VHL双切酶质粒（h）和Von Hippel Lindau/VHL双切酶质粒（h2）编码针对VHL的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Von Hippel Lindau/VHL: sc-135657，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Von Hippel Lindau/VHL双切口酶质粒(h) | sc-400528-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Von Hippel Lindau/VHL双切口酶质粒(h2) | sc-400528-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VHL 编码 von Hippel–Lindau（VHL）肿瘤抑制蛋白，它是 Cullin 2–RING 型 E3 泛素连接酶复合体中负责底物识别的组分，在常氧条件下可将被羟基化的 HIF-α 作为靶标进行泛素化并通过蛋白酶体降解。通过将氧感知与对血管生成、代谢、红细胞生成以及细胞外基质相关转录程序的调控相耦联，VHL 有助于维持细胞稳态并确保适当的缺氧应答。VHL 的缺失或功能异常会扰乱 HIF 信号，并重塑与血管生物学、线粒体代谢和蛋白质稳态相关的通路。VHL 的异常与遗传性 VHL 病密切相关，并且常在肾细胞癌模型中被研究，用于探究缺氧驱动的肿瘤生物学及微环境适应。
Von Hippel Lindau/VHL 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 VHL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对VHL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏VHL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了VHL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。