Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO VASP (m): sc-423654
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- VASP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique VASP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: VASP Antibody (A-11): sc-46668
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO VASP (m) | sc-423654 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Vasp code pour la protéine VASP (vasodilator-stimulated phosphoprotein), une protéine régulatrice de l’actine de la famille Ena/VASP qui coordonne l’élongation des filaments d’actine, la dynamique des adhésions focales et la protrusion membranaire lors de la migration cellulaire. VASP intègre des signaux en aval des kinases dépendantes de l’AMPc/GMPc et des GTPases de la famille Rho afin de coupler l’état de phosphorylation au remodelage du cytosquelette et à la mécanotransduction. Dans les cellules de souris, VASP contribue aux fonctions plaquettaires et endothéliales, à la croissance des neurites et à la motilité des cellules immunitaires en régulant l’adhérence, les propriétés de barrière et le mouvement dirigé. Une dérégulation de la dynamique de l’actine dépendante de VASP a été impliquée dans des modèles de dysfonction vasculaire, des phénotypes liés à la thrombose et des modifications du comportement invasif pertinentes pour l’inflammation et la biologie du cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO VASP (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Vasp dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Vasp, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Vasp à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine VASP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Vasp pour l'étude de la signalisation de VASP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Vasp essentiels à la fonction de VASP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Vasp pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le VASP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le VASP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Vasp. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le VASP plasmide HDR (m) et le VASP (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Vasp pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Vasp définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.