Plasmide Double Nickase (m) Vasohibin-1: sc-433622-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Vasohibin-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Vasohibin-1 Double Nickase (m) et le plasmide Vasohibin-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Vash1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Vasohibin-1 Antibody (C-6): sc-365541
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Vasohibin-1 | sc-433622-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Vasohibin-1 | sc-433622-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène Vash1 de la souris code la vasohibine‑1, un régulateur de l’angiogenèse d’origine endothéliale qui agit comme un facteur de rétrocontrôle négatif induit par des signaux pro‑angiogéniques tels que le VEGF. La vasohibine‑1 module la prolifération, la migration et le bourgeonnement des cellules endothéliales, et s’intègre à des programmes d’homéostasie vasculaire qui façonnent le remodelage de la matrice extracellulaire et la maturation des vaisseaux. Par son influence sur les réseaux de signalisation angiogénique, l’expression de Vash1 est fréquemment étudiée dans des modèles de vascularisation tumorale, de néovascularisation induite par l’ischémie et de microenvironnements inflammatoires. Ces caractéristiques font de la vasohibine‑1 un nœud pertinent pour étudier les interactions entre la signalisation hypoxie/VEGF, les réponses au stress endothélial et le remodelage tissulaire.
Vasohibin-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Vash1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Vash1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Vash1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Vash1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.