Plasmide Double Nickase (h) USP9X: sc-402285-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) USP9X correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide USP9X Double Nickase (h) et le plasmide USP9X Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant USP9X. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) USP9X | sc-402285-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) USP9X | sc-402285-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP9X code une grande protéase spécifique de l’ubiquitine qui retire l’ubiquitine de protéines substrats afin de réguler leur stabilité, leur localisation et l’intensité de leurs signaux. USP9X participe à la protéostasie dépendante de l’ubiquitine et s’inscrit à l’interface de voies contrôlant les décisions de destinée cellulaire, la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN et la signalisation du stress, notamment via la modulation de réseaux de kinases et de l’apoptose. Par son activité de déubiquitination, USP9X influence le trafic endocytique et le renouvellement protéique de facteurs régulateurs clés, façonnant ainsi les programmes transcriptionnels et l’homéostasie cellulaire. Une expression ou une activité dérégulée de USP9X a été associée à des états de signalisation altérés observés dans des troubles du neurodéveloppement ainsi que dans de multiples contextes cancéreux, ce qui en fait une cible fréquente des études mécanistiques sur la biologie des voies de l’ubiquitine.
USP9X Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus USP9X dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de USP9X. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de USP9X. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de USP9X.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.