Plasmide Double Nickase (h) USP43: sc-416563-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) USP43 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide USP43 Double Nickase (h) et le plasmide USP43 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant USP43. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: USP43 Antibody (C-8): sc-398436
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) USP43 | sc-416563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) USP43 | sc-416563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’USP43 humain code une enzyme déubiquitinante du système ubiquitine–protéasome, qui régule la stabilité des protéines et la signalisation en retirant l’ubiquitine des protéines substrats. En tant que protéase spécifique de l’ubiquitine, USP43 est associée au contrôle de la protéostasie et peut influencer les réponses au stress cellulaire, la progression du cycle cellulaire et l’intégrité du génome en modulant le renouvellement dépendant de l’ubiquitine. Des altérations de la dynamique de déubiquitination sont fréquemment liées à des réponses aux dommages de l’ADN dérégulées et à des phénotypes de prolifération aberrants observés dans de multiples contextes pathologiques. L’étude de la fonction d’USP43 aide à préciser comment les enzymes déubiquitinantes façonnent les réseaux de signalisation de l’ubiquitine ainsi que les voies transcriptionnelles et de réparation en aval.
USP43 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus USP43 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de USP43. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de USP43. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de USP43.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.