Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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USF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423629
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USF-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico USF-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:USF-2 Anticorpo (5E9): sc-293443
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423629 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator de transcrição upstream 2 (USF-2), codificado pelo gene murino *Usf2*, é um fator de transcrição do tipo hélice–alça–hélice básica com zíper de leucina que se liga a motivos E-box para regular a atividade de promotores em redes de genes metabólicos e responsivos ao estresse. O USF-2 participa do controle transcricional do metabolismo de glicose e lipídios, da progressão do ciclo celular e de programas de diferenciação, e pode modular o contexto da cromatina por meio de interações com co-reguladores. Em sistemas murinos, alterações na atividade do USF-2 têm sido associadas à desregulação da homeostase metabólica e a mudanças na sinalização proliferativa, sustentando sua relevância para estudos de vias cardiometabólicas e relacionadas ao câncer. Assim, *Usf2* é frequentemente investigado como um nó que conecta a detecção de nutrientes, os circuitos transcricionais e a expressão gênica específica de tecidos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USF-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Usf2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Usf2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Usf2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USF-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Usf2 para a investigação da sinalização de USF-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Usf2 críticos para a função USF-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Usf2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo USF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo USF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Usf2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo USF-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR USF-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Usf2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Usf2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.