UQCRC1 Double Nickase Plasmid (h): sc-404435-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das UQCRC1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- UQCRC1 Double-Nickase-Plasmid (h) und UQCRC1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf UQCRC1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
UQCRC1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UQCRC1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UQCRC1 kodiert eine zentrale strukturelle Untereinheit des mitochondrialen Komplexes III (Ubiquinol–Cytochrom-c-Reduktase) in der inneren Membran. Dadurch unterstützt es den Elektronentransfer innerhalb der Atmungskette und trägt zur Erzeugung der protonenmotorischen Kraft für die oxidative Phosphorylierung bei. Durch die Stabilisierung von Aufbau und Funktion des Komplexes III beeinflusst UQCRC1 die zelluläre ATP-Produktion, das Gleichgewicht reaktiver Sauerstoffspezies und das mitochondriale Membranpotenzial. Störungen von Komplex-III-Komponenten können die metabolische Homöostase und Stresssignalwege beeinträchtigen und verknüpfen UQCRC1 mit Signalwegen, die Bioenergetik, Apoptoseanfälligkeit und mitochondriale Qualitätskontrolle regulieren. Veränderte mitochondriale Atmung und eine beeinträchtigte Integrität von Komplex III sind wiederkehrende Befunde in Studien zu Neurodegeneration, kardiometabolischen Funktionsstörungen und der metabolischen Umprogrammierung von Krebszellen, wodurch UQCRC1 ein nützliches Ziel in der Forschung zur mitochondrialen Biologie darstellt.
UQCRC1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des UQCRC1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von UQCRC1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die UQCRC1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit UQCRC1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.