Plasmide Double Nickase (h) UQCRC1: sc-404435-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) UQCRC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide UQCRC1 Double Nickase (h) et le plasmide UQCRC1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UQCRC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) UQCRC1 | sc-404435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) UQCRC1 | sc-404435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UQCRC1 code une sous-unité structurale essentielle du complexe III mitochondrial (ubiquinol–cytochrome c réductase) de la membrane interne, en soutenant le transfert d’électrons au sein de la chaîne respiratoire et en contribuant à la génération de la force proton-motrice nécessaire à la phosphorylation oxydative. En stabilisant l’assemblage et la fonction du complexe III, UQCRC1 influence la production cellulaire d’ATP, l’équilibre des espèces réactives de l’oxygène et le potentiel de membrane mitochondriale. La perturbation des composants du complexe III peut désorganiser l’homéostasie métabolique et la signalisation de stress, reliant ainsi UQCRC1 à des voies qui régulent la bioénergétique, la sensibilité à l’apoptose et le contrôle qualité mitochondrial. Des altérations de la respiration mitochondriale et de l’intégrité du complexe III sont des caractéristiques récurrentes dans les études sur la neurodégénérescence, les dysfonctionnements cardiométaboliques et la reprogrammation métabolique des cellules cancéreuses, faisant d’UQCRC1 une cible utile en recherche sur la biologie mitochondriale.
UQCRC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UQCRC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UQCRC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UQCRC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UQCRC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.