UQCRC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423625

Übersicht

Uqcrc1 kodiert die Ubiquinol-Cytochrom-c-Reduktase-Kernuntereinheit 1 (UQCRC1), eine essenzielle strukturelle Komponente des mitochondrialen Atmungskettenkomplexes III (Cytochrom-bc1), die den Elektronentransfer von Ubiquinol auf Cytochrom c unterstützt und zur Aufrechterhaltung der oxidativen Phosphorylierung beiträgt. Durch die Beeinflussung des mitochondrialen Membranpotenzials, der ATP-Produktion und der Homöostase reaktiver Sauerstoffspezies trägt UQCRC1 zum zellulären Energiestoffwechsel und zu Redox-Signalprogrammen bei. Störungen der Komplex-III-Funktion können die metabolische Anpassung und Stressantworten beeinträchtigen – Prozesse, die häufig in Modellen der Neurodegeneration, kardiometabolischer Phänotypen und der Biologie proliferativer Erkrankungen untersucht werden. Als Kernuntereinheit von Komplex III wird UQCRC1 häufig in Signalwegen untersucht, die mitochondriale Dysfunktion mit veränderter Apoptose-Empfindlichkeit, hypoxischer Signalgebung und integrierter zellulärer Bioenergetik verknüpfen.

Das UQCRC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Uqcrc1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Uqcrc1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Uqcrc1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die UQCRC1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Uqcrc1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der UQCRC1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Uqcrc1-Exone abzielen, die für die UQCRC1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Uqcrc1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom UQCRC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom UQCRC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Uqcrc1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das UQCRC1 HDR-Plasmid (m) und UQCRC1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Uqcrc1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Uqcrc1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.