Plasmide CRISPR/Cas9 KO UGT2B17 (h2): sc-405611-KO-2

Présentation

UGT2B17 code une UDP‑glucuronosyltransférase qui catalyse la glucuronidation de phase II d’un large éventail de substrats endogènes et xénobiotiques, augmentant leur solubilité et favorisant leur élimination. Cette enzyme contribue à l’homéostasie des hormones stéroïdes et des acides biliaires, et peut moduler l’exposition cellulaire à des métabolites bioactifs et potentiellement toxiques via un métabolisme hépatique et extra‑hépatique. Des variations de l’expression ou du nombre de copies d’UGT2B17 ont été associées à des différences interindividuelles de conjugaison des androgènes et de phénotypes de métabolisme des médicaments, avec des implications pour la biologie liée au système endocrinien et la recherche en pharmacogénomique. Dans des systèmes expérimentaux, l’activité d’UGT2B17 s’inscrit dans les réseaux de détoxification et influence des réponses de signalisation induites par des métabolites.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO UGT2B17 (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène UGT2B17 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du UGT2B17, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert UGT2B17 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine UGT2B17.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en UGT2B17 pour l'étude de la signalisation de UGT2B17, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de UGT2B17 essentiels à la fonction de UGT2B17
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de UGT2B17 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le UGT2B17 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le UGT2B17 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus UGT2B17. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le UGT2B17 plasmide HDR (h) et le UGT2B17 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie UGT2B17 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles UGT2B17 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.