Plasmide Double Nickase (h) UFSP2: sc-408911-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) UFSP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide UFSP2 Double Nickase (h) et le plasmide UFSP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UFSP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: UFSP2 Antibody (G-11): sc-376084
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) UFSP2 | sc-408911-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) UFSP2 | sc-408911-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UFSP2 code la peptidase 2 spécifique d’UFM1, une protéase à cystéine qui transforme UFM1 en sa forme mature et retire les modifications UFM1 des protéines substrats, régulant ainsi le cycle d’UFMylation. Cette activité soutient des voies de protéostasie liées à l’homéostasie du réticulum endoplasmique, au contrôle qualité associé aux ribosomes et à une signalisation sensible au stress qui influence la traduction et la sécrétion des protéines. Les dynamiques d’UFMylation dépendantes d’UFSP2 ont été associées à la fonction des cellules hématopoïétiques et immunitaires, et une dérégulation de cette voie a été impliquée dans des contextes pathologiques humains où le stress du RE et le contrôle qualité des protéines sont perturbés. En tant que cible de recherche, UFSP2 est utilisé pour élucider comment la déUFMylation contrôle le devenir des substrats et l’adaptation au stress dans divers types cellulaires.
UFSP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UFSP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UFSP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UFSP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UFSP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.