Plásmido Doble Nickase (h) UFSP2: sc-408911-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UFSP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UFSP2 (h) y el plásmido de doble nickasa UFSP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UFSP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UFSP2 Anticuerpo (G-11): sc-376084
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UFSP2 | sc-408911-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) UFSP2 | sc-408911-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UFSP2 codifica la peptidasa 2 específica de UFM1, una proteasa de cisteína que procesa UFM1 hasta su forma madura y elimina las modificaciones de UFM1 de las proteínas sustrato, regulando así el ciclo de UFMilación. Esta actividad respalda vías de proteostasis vinculadas a la homeostasis del retículo endoplásmico, el control de calidad asociado al ribosoma y la señalización sensible al estrés que influyen en la traducción y secreción de proteínas. La dinámica de la UFMilación dependiente de UFSP2 se ha relacionado con la función de células hematopoyéticas e inmunitarias, y la regulación alterada de esta vía se ha implicado en contextos de enfermedad humana en los que se ven afectados el estrés del RE y el control de calidad proteico. Como diana de investigación, UFSP2 se utiliza para dilucidar cómo la desUFMilación controla el recambio de sustratos y la adaptación al estrés en diversos tipos celulares.
UFSP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UFSP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UFSP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UFSP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UFSP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.