Plásmido Doble Nickase (h) Ub-RPS27A: sc-416542-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ub-RPS27A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ub-RPS27A (h) y el plásmido de doble nickasa Ub-RPS27A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RPS27A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ub-RPS27A | sc-416542-NIC | 20 µg | $410.00 |
RPS27A codifica una proteína de fusión que se procesa postraduccionalmente para generar ubiquitina y la proteína ribosomal S27a de la subunidad 40S, vinculando la proteostasis dependiente de ubiquitina con la biogénesis ribosomal y la traducción. La ubiquitina producida a partir de Ub-RPS27A contribuye al recambio proteico mediante el sistema ubiquitina–proteasoma, a la regulación de la señalización del daño en el ADN y a la remodelación del proteoma en respuesta al estrés. El componente S27a se incorpora a la subunidad ribosomal pequeña y favorece la decodificación del ARNm y la capacidad translacional global. La desregulación de las proteínas ribosomales y de la homeostasis de la ubiquitina se ha implicado en alteraciones del control del crecimiento celular, en respuestas al estrés proteotóxico y en vías de mantenimiento del genoma relevantes para la investigación en cáncer y neurodegeneración.
Ub-RPS27A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RPS27A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RPS27A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RPS27A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RPS27A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.