U11/U12 snRNP 20K Double Nickase Plasmid (h): sc-409456-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das U11/U12 snRNP 20K Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- U11/U12 snRNP 20K Double-Nickase-Plasmid (h) und U11/U12 snRNP 20K Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ZMAT5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
U11/U12 snRNP 20K Double Nickase Plasmid (h) | sc-409456-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZMAT5 kodiert U11/U12 snRNP 20K, eine Kernkomponente des minoren (U12-abhängigen) Spleißosoms, die an der Erkennung und Verarbeitung von U12‑Typ-Introns beteiligt ist. Über seine Funktion beim pre‑mRNA‑Spleißen und beim Aufbau des Spleißosoms trägt U11/U12 snRNP 20K dazu bei, die Transkript-Treue von Genen aufrechtzuerhalten, die besonders in Signalübertragung, DNA‑Reparatur und Zellzyklusregulation angereichert sind. Eine Störung der Funktion des minoren Spleißosoms kann das Isoformen-Gleichgewicht verändern und weitreichende Änderungen in Genexpressionsprogrammen auslösen, die mit Differenzierung und Stressantworten verknüpft sind. Daher ist ZMAT5 für Studien zur Spleiß-Fehlregulation relevant, wie sie bei genetischen Erkrankungen und bei krebsassoziierten RNA‑Prozessierungsphänotypen beobachtet wird.
U11/U12 snRNP 20K Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ZMAT5-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ZMAT5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ZMAT5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ZMAT5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.