TWEAK CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401202

개요

TNFSF12는 사이토카인 TWEAK(TNF-like weak inducer of apoptosis)를 암호화하며, TWEAK는 용해성 리간드로 방출될 수 있는 II형 막관통 단백질로서 주로 FN14/TNFRSF12A 수용체를 통해 신호를 전달합니다. TWEAK–FN14 결합은 NF-κB 및 MAPK 경로의 활성을 조절하여 세포 생존, 증식, 이동, 분화, 염증성 유전자 발현에 영향을 미치며, 상황에 따라 세포사멸과 조직 리모델링에 미치는 효과가 달라질 수 있습니다. 이 축은 손상되거나 스트레스를 받은 조직에서 혈관신생 및 섬유화 프로그램의 조절뿐 아니라 면역세포 유입과 사이토카인 네트워크 조절에도 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 조절이상된 TWEAK/FN14 신호전달은 염증 및 자가면역성 병태생리, 신경염증 과정, 종양 미세환경 리모델링과 연관되어 왔으며, 면역학 및 암생물학 분야에서의 기전 연구를 뒷받침합니다.

TWEAK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TNFSF12 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TNFSF12 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TNFSF12의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TWEAK 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TWEAK 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TNFSF12 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TWEAK 기능에 중요한 TNFSF12 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TNFSF12 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TWEAK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TWEAK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TNFSF12 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TWEAK HDR 플라스미드 (h) 및 TWEAK HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TNFSF12 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TNFSF12 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.