Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) TTP: sc-423781-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TTP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TTP Double Nickase (m) et le plasmide TTP Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Zfp36. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TTP Antibody (A-8): sc-374305
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TTP | sc-423781-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Zfp36** code la tristetraproline (TTP), une protéine de liaison à l’ARN reconnaissant les éléments riches en AU, qui favorise la déadénylation et la dégradation d’ARNm instables, notamment de nombreux transcrits de cytokines et de gènes de réponse immédiate. En recrutant le complexe déadénylase **CCR4–NOT** et en modulant la régulation génique post-transcriptionnelle, TTP façonne les sorties de signalisation inflammatoire en aval de voies telles que **TNF/NF-κB** et **MAPK/p38**. Une activité **Zfp36/TTP** altérée est associée à une homéostasie des cytokines dérégulée et à des phénotypes inflammatoires, et est fréquemment étudiée dans le contexte de l’activation des cellules immunitaires, des réponses des macrophages et du remodelage des transcrits induit par le stress. En tant que nœud des réseaux de renouvellement des ARNm, TTP constitue un point d’entrée accessible pour disséquer la manière dont la stabilité de l’ARN contrôle des programmes d’expression génique pertinents pour les pathologies associées à l’inflammation.
TTP Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Zfp36 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Zfp36. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Zfp36. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Zfp36.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.