Plasmide Double Nickase (h) TSSC4: sc-410490-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TSSC4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TSSC4 Double Nickase (h) et le plasmide TSSC4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TSSC4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TSSC4 | sc-410490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TSSC4 | sc-410490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSSC4 (tumor suppressing subtransferable candidate 4) est un gène humain codant une protéine, initialement cartographié dans la région imprimée 11p15.5, et étudié dans le contexte du contrôle de la croissance et de la biologie tumorale. Bien que sa fonction moléculaire reste imparfaitement définie, TSSC4 a été associé à des programmes cellulaires qui régissent la prolifération et la survie, et son environnement génomique est fréquemment analysé sous l’angle de la régulation épigénétique et de l’expression spécifique d’allèle. Une dérégulation au sein du locus 11p15.5 est liée à des troubles du développement et de la croissance ainsi qu’à des processus oncogéniques, ce qui fait de TSSC4 une cible utile pour des études mécanistiques des voies associées à l’empreinte génomique. La perturbation expérimentale de TSSC4 permet d’examiner comment la régulation à l’échelle du locus influence le comportement du cycle cellulaire et des réseaux transcriptionnels sensibles au stress.
TSSC4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TSSC4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TSSC4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TSSC4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TSSC4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.