TSHβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423526
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TSHβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TSHβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TSHβ Anticorpo (D-6): sc-365801
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TSHβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423526 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tshb codifica a subunidade beta do hormônio estimulador da tireoide (TSHβ), um componente de um hormônio glicoproteico hipofisário que confere especificidade de receptor à sinalização do TSH na glândula tireoide. Nos tireotrofos, a expressão de Tshb é controlada pelo hormônio liberador de tireotropina do hipotálamo e pelo feedback negativo dos hormônios tireoidianos, integrando a homeostase endócrina a programas transcricionais que regem a diferenciação hipofisária e a produção hormonal. A ativação do receptor de TSH mediada por TSHβ promove a biossíntese de hormônios tireoidianos e a regulação metabólica sistêmica, conectando esse eixo a processos como crescimento, balanço energético e termogênese. A desregulação de Tshb e do feedback hipotálamo–hipófise–tireoide a montante é relevante para modelos experimentais de disfunção central do eixo tireoidiano e para fenótipos endócrinos que afetam o desenvolvimento e o metabolismo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSHβ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tshb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tshb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tshb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSHβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tshb para a investigação da sinalização de TSHβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tshb críticos para a função TSHβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tshb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TSHβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TSHβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tshb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TSHβ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TSHβ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tshb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tshb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.