tsg 101 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423524-LAC

Das Mausgen **Tsg101** kodiert das Tumorsuszeptibilitätsgen 101 (**tsg101**), eine zentrale Komponente des **ESCRT-I**-Komplexes, der die endosomale Sortierung, die Biogenese multivesikulärer Körper (MVBs) und den lysosomalen Abbau ubiquitinierter Membranproteine koordiniert. Über ESCRT-abhängige Membranremodellierung trägt **TSG101** außerdem zur Abtrennung (Abszission) während der Zytokinese bei und unterstützt die Biogenese extrazellulärer Vesikel, wodurch es mit Proteostase und interzellulärer Kommunikation verknüpft ist. Eine Störung oder Fehlregulation von Komponenten des ESCRT-Signalwegs, einschließlich **TSG101**, wurde mit verändertem Rezeptortransport, Stressantworten und Genomstabilität in Verbindung gebracht, was **Tsg101** zu einem geeigneten Knotenpunkt für die Untersuchung der Dynamik onkogener Signalgebung und neurodegenerationsrelevanter proteotoxischer Prozesse macht. In Mausmodellen hilft die Perturbation von **Tsg101**, zu untersuchen, wie der endolysosomale Flux den Umsatz von Wachstumsfaktorrezeptoren und nachgeschaltete Signalwege wie die EGFR-gekoppelte **MAPK**- und **PI3K**-Signalgebung beeinflusst.

tsg 101 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Tsg101-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

tsg 101 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Tsg101-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen tsg 101-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Tsg101-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.