Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) TRPC1: sc-423512-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TRPC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRPC1 Double Nickase (m) et le plasmide TRPC1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Trpc1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRPC1 Antibody (E-6): sc-133076
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TRPC1 | sc-423512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) TRPC1 | sc-423512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Trpc1 code TRPC1, une sous-unité de canal cationique non sélectif qui contribue à l’entrée de Ca2+ dépendante des récepteurs et à l’entrée de Ca2+ dépendante des stocks dans de nombreux types cellulaires chez la souris. En façonnant la dynamique intracellulaire du Ca2+, TRPC1 module des processus tels que l’excitabilité membranaire, le remodelage du cytosquelette, la migration cellulaire et des programmes transcriptionnels en aval des récepteurs couplés à la PLC et de la signalisation STIM–ORAI. L’activité de TRPC1 s’articule avec les voies dépendantes de MAPK et de NFAT, influençant la différenciation cellulaire et les réponses au stress. Une homéostasie du Ca2+ médiée par TRPC1 dérégulée a été impliquée dans des modèles expérimentaux de remodelage cardiovasculaire, de neuroinflammation et de signalisation fibrotique, ce qui étaye sa pertinence pour des études mécanistiques des voies associées aux maladies.
TRPC1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Trpc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Trpc1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Trpc1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Trpc1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.