Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO TRMT1 (h): sc-410018
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TRMT1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TRMT1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRMT1 Antibody (G-3): sc-373687
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TRMT1 (h) | sc-410018 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TRMT1 code pour la tRNA méthyltransférase 1, une enzyme de modification de l’ARN qui catalyse la formation de la N2,N2-diméthylguanosine (m2,2G) en position 26 sur de nombreux ARNt cytosoliques. Cette modification favorise le repliement correct des ARNt et la fidélité du décodage, influençant ainsi l’efficacité globale de la traduction et la protéostasie. L’activité de TRMT1 relie la régulation épitranscriptomique de l’ARN aux réponses cellulaires au stress, avec des effets en aval sur les programmes de synthèse protéique durant la croissance et la différenciation. Une altération de la fonction de TRMT1 a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui en fait une cible utile pour analyser comment la dynamique des modifications des ARNt façonne l’expression génique neuronale et l’adaptation au stress.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TRMT1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TRMT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TRMT1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TRMT1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TRMT1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TRMT1 pour l'étude de la signalisation de TRMT1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TRMT1 essentiels à la fonction de TRMT1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TRMT1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TRMT1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TRMT1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TRMT1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TRMT1 plasmide HDR (h) et le TRMT1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TRMT1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TRMT1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.