Tris Acetate-EDTA buffer, 50X

Le tampon Tris acétate-EDTA (TAE), communément appelé TAE 50X dans sa forme concentrée, est une solution tampon largement utilisée en biologie moléculaire, en particulier pour la séparation électrophorétique des acides nucléiques. Ce tampon est composé d'un mélange de base Tris (Tris(hydroxyméthyl)aminométhane), d'acide acétique et d'EDTA (acide éthylène diamine tétra-acétique). Le rôle principal du tampon TAE est de maintenir un pH stable pendant l'électrophorèse, ce qui est crucial pour la migration régulière de l'ADN à travers les gels d'agarose. Le tampon TAE facilite le mouvement de l'ADN sous un champ électrique en fournissant des ions qui transportent le courant et aident à stabiliser l'environnement de charge autour des molécules d'ADN. Le composant EDTA du tampon agit comme un agent chélateur ; il lie les ions métalliques divalents tels que Mg²⁺ et Ca²⁺, qui sont des cofacteurs nécessaires pour les nucléases. En séquestrant ces ions, l'EDTA inhibe l'activité enzymatique qui pourrait autrement dégrader les acides nucléiques au cours du processus d'électrophorèse. Les applications de recherche du tampon TAE ne se limitent pas à la simple électrophorèse sur gel d'ADN. Il est également utilisé dans des techniques de biologie moléculaire plus nuancées telles que l'électrophorèse sur gel à champ pulsé (PFGE) et l'électrophorèse sur gel à inversion de champ (FIGE), où son pouvoir tampon aide à gérer les changements d'orientation et d'intensité du champ électrique, favorisant ainsi la séparation de très grands fragments d'ADN. Le pouvoir tampon légèrement inférieur du TAE par rapport à d'autres tampons comme le TBE (Tris-Borate-EDTA) peut être avantageux dans ces applications car il permet une meilleure résolution des grands fragments d'ADN au prix d'une recirculation plus fréquente du tampon pour éviter les changements de pH pendant les cycles prolongés.