Plasmide Double Nickase (h) TRIM72: sc-403554-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRIM72 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRIM72 Double Nickase (h) et le plasmide TRIM72 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRIM72. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRIM72 Antibody (A-10): sc-514706
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRIM72 | sc-403554-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRIM72 | sc-403554-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM72 (également appelé MG53) code une ligase E3 d’ubiquitine à motif tripartite, particulièrement exprimée dans le muscle, qui coordonne la réparation de la membrane plasmique et le maintien de la protéostase en réponse à des lésions mécaniques ou oxydatives. TRIM72 participe au trafic vésiculaire et à la signalisation induite par les dommages en servant de plateforme d’assemblage pour des complexes de réparation et en modulant, via l’ubiquitine, le renouvellement de composants clés, en s’intégrant aux processus de réponse au stress et de remodelage membranaire. Dans le muscle strié et les cardiomyocytes, l’activité de TRIM72 influe sur la résilience cellulaire en régulant l’efficacité de la réparation ainsi que des signaux inflammatoires et métaboliques en aval. Une expression ou une fonction dérégulée de TRIM72 a été associée à des phénotypes de lésions musculaires et à des états de stress cardiométabolique, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de l’intégrité membranaire et de la signalisation du stress dans les cellules humaines.
TRIM72 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRIM72 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRIM72. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRIM72. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRIM72.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.