Plasmide Double Nickase (h) TRIM69: sc-404906-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRIM69 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRIM69 Double Nickase (h) et le plasmide TRIM69 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRIM69. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRIM69 | sc-404906-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRIM69 | sc-404906-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM69 code une ligase E3 ubiquitine de la famille des motifs tripartites (TRIM), impliquée dans la régulation, dépendante de l’ubiquitine, de la stabilité des protéines et de la signalisation. En tant que protéine de type RING–B-box–coil-coiled, TRIM69 est associée au contrôle de l’immunité innée des réponses antivirales et à la modulation des voies liées aux interférons, en influençant le renouvellement (turnover) ou l’activité d’intermédiaires clés de signalisation. Des programmes d’ubiquitination altérés au sein de la famille TRIM peuvent remodeler la signalisation inflammatoire, les réponses au stress et les transitions d’état cellulaire, ce qui fait de TRIM69 une cible pertinente pour des études mécanistiques de la régulation immunitaire et des interactions hôte–pathogène. La dérégulation des circuits d’ubiquitination associés à TRIM69 a également été étudiée dans des contextes où une protéostase aberrante et une signalisation immunitaire contribuent à des phénotypes pathologiques.
TRIM69 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRIM69 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRIM69. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRIM69. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRIM69.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.