Plasmide Double Nickase (h) TRIM2: sc-410495-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRIM2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRIM2 Double Nickase (h) et le plasmide TRIM2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRIM2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRIM2 | sc-410495-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRIM2 | sc-410495-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM2 code une ligase E3 de l’ubiquitine contenant un motif tripartite, impliquée dans le renouvellement des protéines dépendant de l’ubiquitine et l’organisation du cytosquelette, avec des rôles marqués dans le maintien neuronal. Via ses domaines RING, B-box et coiled-coil, TRIM2 participe à la protéostasie et aux voies de réponse au stress qui modèlent l’intégrité des axones, la fonction synaptique et le trafic intracellulaire. Une activité altérée de TRIM2 a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, en accord avec son enrichissement dans le système nerveux et son implication dans la régulation de la stabilité de substrats neuronaux clés. Ces caractéristiques font de TRIM2 un nœud pertinent pour étudier la régulation par le système ubiquitine–protéasome, la dynamique du cytosquelette et les mécanismes de vulnérabilité spécifiques des types cellulaires.
TRIM2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRIM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRIM2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRIM2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRIM2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.