TRAP95 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405827

개요

MED16은 자극 의존적 유전자 발현을 조율하기 위해, 서열 특이적 전사인자와 RNA 중합효소 II를 연결해 주는 Mediator 복합체의 필수 소단위인 TRAP95를 암호화합니다. TRAP95는 프로모터와 인핸서에서 여러 상위 신호 경로를 통합하는 역할을 반영하듯, 세포주기 조절, 분화, 스트레스 반응성 신호전달과 연관된 전사 조절 프로그램에 기여합니다. MED16의 교란을 포함한 Mediator 기능의 변화는 암을 비롯해 세포 정체성과 항상성에 이상이 생기는 다양한 질환에서 관찰되는 광범위한 전사 조절 이상과 연관되어 왔습니다. 사람의 핵 내 조절 단백질인 TRAP95는 전사 네트워크 및 크로마틴 연관 유전자 발현 조절에서의 기여를 중심으로 흔히 연구됩니다.

TRAP95 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MED16 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MED16 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MED16의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRAP95 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRAP95 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MED16 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRAP95 기능에 중요한 MED16 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MED16 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRAP95 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TRAP95 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MED16 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRAP95 HDR 플라스미드 (h) 및 TRAP95 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MED16 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MED16 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.