Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) TRAP150: sc-432980-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TRAP150 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRAP150 Double Nickase (m) et le plasmide TRAP150 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Thrap3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRAP150 Antibody (F-10): sc-133250
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TRAP150 | sc-432980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) TRAP150 | sc-432980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La Thrap3 murine code TRAP150, un facteur nucléaire de liaison à l’ARN et associé à la transcription, impliqué dans le couplage entre la transcription, l’épissage du pré‑ARNm et la maturation de l’extrémité 3′. TRAP150 participe à la maturation des mRNP et interagit avec des composants du spliceosome et de la machinerie transcriptionnelle, influençant les décisions d’épissage alternatif et les programmes d’expression génique. Ces fonctions relient Thrap3 à la régulation de la progression du cycle cellulaire et à des réseaux transcriptionnels sensibles au stress, fréquemment perturbés en biologie du cancer. La coordination altérée entre épissage et transcription associée à l’activité de TRAP150 fait de ce gène une cible pertinente pour étudier les mécanismes à l’origine de l’expression génique oncogénique et des défauts de maturation de l’ARN.
TRAP150 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Thrap3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Thrap3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Thrap3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Thrap3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.