Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) TRAP-1: sc-402963-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRAP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRAP-1 Double Nickase (h) et le plasmide TRAP-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TGFBRAP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRAP-1 Antibody (C-8): sc-13134
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRAP-1 | sc-402963-NIC | 20 µg | $410.00 |
TGFBRAP1 code pour TRAP‑1, un adaptateur intracellulaire associé au complexe récepteur du transforming growth factor‑β (TGF‑β), qui soutient le trafic du récepteur, l’assemblage des complexes de signalisation et la modulation des voies en aval. En influençant l’équilibre entre les réponses transcriptionnelles dépendantes des SMAD et les interactions avec la voie MAPK et d’autres voies sensibles au stress, TRAP‑1 contribue à la régulation de la prolifération cellulaire, de la différenciation et de l’homéostasie de la matrice extracellulaire. Une régulation altérée de la voie TGF‑β est impliquée dans la fibrose, la régulation immunitaire et des changements liés au cancer concernant la plasticité épithélio‑mésenchymateuse et le remodelage du microenvironnement, ce qui fait de TGFBRAP1 un nœud utile pour des études mécanistiques. La fonction de TRAP‑1 chez l’humain est également pertinente pour analyser comment des échafaudages associés aux récepteurs ajustent l’amplitude et la durée du signal dans des contextes de signalisation spécifiques.
TRAP-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TGFBRAP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TGFBRAP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TGFBRAP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TGFBRAP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.