TPX2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402581-LAC

TPX2 (targeting protein for Xklp2) kodiert einen mikrotubuliassoziierten Spindelaufbaufaktor, der sich an Zentrosomen und Spindelmikrotubuli anreichert, um die Aktivierung der Aurora‑A‑Kinase zu fördern und während der Mitose Kinetochorfasern zu stabilisieren. Durch die Koordination der Mikrotubuli-Nukleation, der Organisation der Spindelpole und der Chromosomentrennung trägt TPX2 zur Steuerung der Zellzyklusprogression durch den G2/M-Übergang bei und unterstützt die Zuverlässigkeit der Kontrolle durch den mitotischen Checkpoint. Eine dysregulierte TPX2-Expression ist häufig mit proliferativen Phänotypen und genomischer Instabilität assoziiert, weshalb TPX2 in Studien zu Aneuploidie, mitotischen Stressantworten und Tumorbiologie широко als Marker und mechanistischer Knotenpunkt verwendet wird. TPX2-abhängige Signalgebung überschneidet sich mit Signalwegen, die die Mikrotubuli-Dynamik, die Zentrosomenfunktion und durch Aurora-Kinasen regulierte Phosphorylierungsnetzwerke steuern.

TPX2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TPX2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TPX2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TPX2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TPX2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TPX2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.