TPPP3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405113-LAC

TPPP3 (Tubulin-Polymerisation förderndes Protein, Familienmitglied 3) kodiert ein mikrotubuliassoziiertes Protein, das an der Regulation der Mikrotubuli-Polymerisation, der Organisation des Zytoskeletts und des intrazellulären Transports beteiligt ist. Über seine Effekte auf die Mikrotubuli-Dynamik kann TPPP3 Prozesse wie die Funktion des mitotischen Spindelapparats, die Zellpolarität und das motile Verhalten beeinflussen, die eng mit der Zellzykluskontrolle und epithelialen Differenzierungsprogrammen verknüpft sind. Eine veränderte TPPP3-Expression wurde in mehreren Krebskontexten beschrieben, was seine Eignung als molekularer Marker zur Untersuchung von Tumorzellzustand, Proliferation und zytoskelettaler Umgestaltung unterstützt. Diese Eigenschaften machen TPPP3 zu einem relevanten Ziel für die Erforschung mikrotubuliabhängiger Signalwege und von Phänotypwechseln in humanen Zellmodellen.

TPPP3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TPPP3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TPPP3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TPPP3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TPPP3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TPPP3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.