TNP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423464

Descripción general

Tnp2 codifica la proteína de transición 2 (TNP2), un factor de remodelación de la cromatina específico del espermatozoide que reemplaza a las histonas durante las etapas tardías de la espermiogénesis y facilita la posterior incorporación de protaminas para una compactación estable del ADN. Esta proteína participa en el programa coordinado de intercambio de histonas por protaminas, favoreciendo la condensación nuclear, la integridad del genoma y una morfología adecuada de la cabeza espermática. La alteración de Tnp2 perturba la dinámica del empaquetamiento de la cromatina y puede provocar una maduración espermática deficiente y fenotipos de fertilidad masculina reducida. Como modelo, la TNP2 de ratón se utiliza ampliamente para estudiar la reprogramación epigenética, el silenciamiento transcripcional posmeiótico y la regulación de la arquitectura de la cromatina en células germinales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TNP2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnp2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnp2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnp2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TNP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnp2 para la investigación de la señalización de TNP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tnp2 críticos para la función de TNP2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnp2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TNP2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TNP2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnp2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TNP2 (m) y el plásmido HDR TNP2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnp2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnp2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.