Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) TNFβ: sc-403005-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TNFβ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TNFβ Double Nickase (h) et le plasmide TNFβ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LTA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TNFβ Antibody (E-6): sc-28345
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TNFβ | sc-403005-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TNFβ | sc-403005-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **LTA** code la lymphotoxine-α (TNFβ), une cytokine de la superfamille du TNF produite principalement par les lymphocytes activés, qui transmet des signaux via **TNFR1/TNFR2** et, au sein de complexes membranaires associés à **LTβ**, via **LTβR**. TNFβ active les voies canoniques **NF-κB** et **MAPK** afin de réguler l’expression des gènes inflammatoires, la survie cellulaire et l’apoptose, ainsi que l’organisation des microenvironnements des tissus lymphoïdes. Elle contribue au dialogue entre cellules immunitaires et stroma, à l’activation endothéliale et à des réseaux de cytokines qui façonnent les réponses immunitaires adaptatives. Une signalisation LTA dérégulée a été associée à l’inflammation chronique et à des pathologies à médiation immunitaire, ainsi qu’aux interactions tumeur–système immunitaire dans le microenvironnement.
TNFβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LTA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LTA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LTA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LTA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.