TMEM63B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412530

Descripción general

TMEM63B codifica la proteína transmembrana 63B, una proteína multipaso de membrana implicada en la señalización mecanosensible y osmorreguladora mediante actividad de canal permeable a iones. Contribuye a la homeostasis celular al vincular la tensión de la membrana y los cambios de volumen con procesos posteriores dependientes de Ca²⁺, influyendo en la excitabilidad neuronal, la dinámica del citoesqueleto y las vías de respuesta al estrés. La expresión de TMEM63B está enriquecida en el sistema nervioso y se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que la hace relevante para estudios de la función sináptica y la transducción sensorial. La actividad alterada de TMEM63B también se ha explorado en el contexto de la migración celular y el tráfico de membranas, lo que respalda funciones más amplias en redes de señalización específicas de tejidos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM63B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM63B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM63B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM63B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM63B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM63B para la investigación de la señalización de TMEM63B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM63B críticos para la función de TMEM63B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM63B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM63B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM63B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM63B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM63B (h) y el plásmido HDR TMEM63B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM63B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM63B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.