TMEM205 Lentiviral Activation Particles (h): sc-408587-LAC

TMEM205 kodiert ein mehrfach die Membran durchspannendes Transmembranprotein, das in zellulären Membranen lokalisiert ist und mit der Regulation des intrazellulären Transports sowie membranassoziierten Transportprozessen in Verbindung gebracht wurde. Eine veränderte TMEM205-Expression wurde mit Veränderungen in der zellulären Stressbewältigung und in Wirkstoff-Transportphänotypen assoziiert, was TMEM205 für Studien zur Anpassung von Tumorzellen und zu Mechanismen der Chemoresistenz relevant macht. Als Membranprotein mit begrenzter funktioneller Annotation wird TMEM205 häufig mittels Expressionsmodulation untersucht, um die Einbindung in Signal- und Stoffwechselwege zu definieren, einschließlich Effekten auf Vesikeldynamik, Membranpermeabilität und zelluläre Antwortprogramme. Diese Eigenschaften machen TMEM205 zu einem nützlichen Ziel für funktionelle Genomik in der Krebsbiologie und der Zellphysiologie.

TMEM205 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TMEM205-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TMEM205 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TMEM205-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TMEM205-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TMEM205-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.