Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TMEM205 (m): sc-433421
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TMEM205 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TMEM205, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TMEM205 Antibody (B-5): sc-514568
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TMEM205 (m) | sc-433421 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tmem205 code TMEM205, une protéine membranaire multipasse impliquée dans les processus de transport cellulaire à la membrane plasmique et au sein du système endomembranaire, à laquelle on attribue notamment des rôles dans la régulation de l’accumulation intracellulaire et de l’efflux de xénobiotiques et de composés contenant des métaux. TMEM205 a été associée à un remodelage adaptatif au stress du trafic membranaire et du transport vésiculaire, des processus en interface avec la protéostasie et la réponse cellulaire aux agressions cytotoxiques. Une expression altérée de TMEM205 a été corrélée à des phénotypes de réponse aux médicaments dans des modèles de cancer, ce qui en fait une cible utile pour disséquer les mécanismes de chimiorésistance et la régulation du transport membranaire. Dans les systèmes murins, la perturbation de Tmem205 peut aider à préciser comment des protéines membranaires de type transporteur influencent l’homéostasie cellulaire et la sensibilité aux défis environnementaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TMEM205 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tmem205 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tmem205, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tmem205 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TMEM205.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tmem205 pour l'étude de la signalisation de TMEM205, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tmem205 essentiels à la fonction de TMEM205
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tmem205 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TMEM205 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TMEM205 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tmem205. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TMEM205 plasmide HDR (m) et le TMEM205 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tmem205 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tmem205 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.