TMEM125 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-414318

Panoramica

TMEM125 codifica una proteina transmembrana multipasso con ruoli emergenti nell’organizzazione delle membrane e nel traffico intracellulare, processi che influenzano il turnover dei recettori e la segnalazione compartimentalizzata. La sua espressione è stata riportata in numerosi tessuti e, a livello di trascritti, sono state osservate alterazioni dell’espressione in diversi dataset di malattia, suggerendo una possibile rilevanza per l’omeostasi cellulare in condizioni di stress. Sebbene l’annotazione meccanicistica rimanga limitata, TMEM125 viene spesso valutato in studi di genomica funzionale incentrati su vie prossimali alla membrana, dinamica degli organelli e proteostasi. Queste caratteristiche rendono TMEM125 un bersaglio utile per analizzare come le proteine di membrana plasmino le reti di segnalazione e le transizioni dello stato cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TMEM125 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TMEM125 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TMEM125 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TMEM125 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TMEM125.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TMEM125 per lo studio della segnalazione di TMEM125, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TMEM125 critici per la funzione di TMEM125
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TMEM125 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TMEM125 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TMEM125 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TMEM125. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TMEM125 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TMEM125 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TMEM125 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TMEM125 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.