Plasmide Double Nickase (h) TLR9: sc-400600-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TLR9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TLR9 Double Nickase (h) et le plasmide TLR9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TLR9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TLR9 Antibody (5G5): sc-47723
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TLR9 | sc-400600-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TLR9 | sc-400600-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur Toll-like 9 (TLR9) est un récepteur endosomal de reconnaissance des motifs (PRR) qui détecte des motifs CpG non méthylés dans l’ADN d’origine microbienne ou endogène, déclenchant la détection par l’immunité innée. Après liaison du ligand et traitement protéolytique dans l’endosome, TLR9 signale principalement via l’adaptateur MyD88 afin d’activer les programmes transcriptionnels de NF-κB et des IRF, induisant la production de cytokines inflammatoires et des réponses d’interféron de type I. Cette voie contribue à l’immunité antivirale et antibactérienne et module la fonction des cellules présentatrices d’antigène, notamment l’activation des cellules B. Une signalisation TLR9 dérégulée a été associée à des phénotypes autoinflammatoires et auto-immuns et a été étudiée dans des contextes tels que le lupus érythémateux systémique, le psoriasis et l’inflammation associée aux tumeurs.
TLR9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TLR9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TLR9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TLR9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TLR9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.