TLR7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431302

Descripción general

Tlr7 codifica el receptor tipo Toll 7 (TLR7), un receptor endosomal de reconocimiento de patrones que detecta ARN monocatenario y ligandos sintéticos de imidazoquinolina para iniciar la señalización de la inmunidad innata. Tras su activación, TLR7 se acopla a MYD88 y activa la vía de señalización IRAK–TRAF6 para impulsar la transcripción, dependiente de NF-κB e IRF7, de interferones de tipo I y citocinas proinflamatorias, modulando las defensas antivirales y las respuestas de los linfocitos B. En ratones, la actividad de TLR7 influye en la activación de las células dendríticas, la dinámica de los centros germinales y los microambientes de citocinas que coordinan la inmunidad adaptativa. La desregulación de la señalización de TLR7 se ha implicado en fenotipos inflamatorios y autoinmunes, y se estudia con frecuencia en modelos de activación inmunitaria sistémica y detección de patógenos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TLR7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tlr7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tlr7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tlr7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TLR7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tlr7 para la investigación de la señalización de TLR7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tlr7 críticos para la función de TLR7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tlr7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TLR7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TLR7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tlr7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TLR7 (m) y el plásmido HDR TLR7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tlr7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tlr7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.