TLR6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423420

Übersicht

Tlr6 kodiert den Toll-like-Rezeptor 6 (TLR6), einen Mustererkennungsrezeptor, der funktionelle Heterodimere mit TLR2 bildet, um mikrobielle Lipopeptide an der Zelloberfläche zu erkennen und die angeborene Immunantwort zu initiieren. Nach Ligandenbindung rekrutiert TLR6 Adapterproteine wie MYD88 und aktiviert dadurch die IRAK–TRAF6-Signalkaskade, was zur Aktivierung der NF-κB- und MAPK-Signalwege sowie zur Induktion entzündlicher Zytokine und Chemokine führt. In myeloiden und epithelialen Kompartimenten der Maus trägt TLR6 zur Ausprägung antimikrobieller Antworten bei und moduliert die Wechselwirkungen zwischen angeborener und adaptiver Immunität. Eine Fehlregulation der TLR6-abhängigen Signalübertragung wurde mit entzündlicher Pathobiologie in Verbindung gebracht, darunter veränderte Reaktionen in Modellen für Infektionen, Atemwegsentzündungen und metabolische Entzündung.

Das TLR6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Tlr6-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Tlr6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Tlr6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TLR6-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Tlr6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TLR6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Tlr6-Exone abzielen, die für die TLR6-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Tlr6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TLR6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TLR6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Tlr6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TLR6 HDR-Plasmid (m) und TLR6 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Tlr6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Tlr6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.