Plasmide Double Nickase (h) TLR2: sc-400267-NIC

TLR2 code le récepteur Toll-like 2, un récepteur de reconnaissance de motifs situé à la membrane plasmique qui détecte les lipoprotéines bactériennes et d’autres ligands microbiens, souvent via une hétérodimérisation avec TLR1 ou TLR6. Après activation, TLR2 transmet le signal par des voies dépendantes de MYD88 et de TIRAP afin d’induire les cascades NF-κB et MAPK, ce qui entraîne la transcription de cytokines et de chimiokines pro-inflammatoires et module le dialogue entre immunité innée et immunité adaptative. L’activité de TLR2 s’articule aussi avec des programmes liés à la phagocytose, à l’autophagie et à l’inflammasome, influençant les réponses antimicrobiennes et l’homéostasie tissulaire. Une signalisation TLR2 dérégulée a été impliquée dans des états inflammatoires chroniques et des pathologies associées aux infections, faisant de TLR2 une cible largement étudiée dans la recherche sur les interactions hôte–microbe et l’inflammation stérile.

TLR2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TLR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TLR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TLR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TLR2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.