Plasmide Double Nickase (h) TLK2: sc-405426-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TLK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TLK2 Double Nickase (h) et le plasmide TLK2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TLK2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TLK2 Antibody (E-12): sc-393506
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TLK2 | sc-405426-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TLK2 | sc-405426-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La kinase Tousled-like 2 (TLK2) est une kinase sérine/thréonine qui intervient dans la régulation de la chromatine et le maintien du génome au cours de la réplication de l’ADN et de la progression du cycle cellulaire. TLK2 phosphoryle des substrats impliqués dans l’assemblage des nucléosomes et l’activité de chaperons d’histones, reliant ainsi le remodelage de la chromatine couplé à la réplication à la signalisation des dommages à l’ADN et aux mécanismes de récupération. Par ces fonctions, TLK2 influence les réponses au stress réplicatif, le contrôle des points de contrôle (checkpoints) et le maintien de l’intégrité épigénétique. Une activité ou un dosage altérés de TLK2 ont été associés à des phénotypes neurodéveloppementaux et ont été étudiés dans des contextes où une dynamique de la chromatine perturbée et l’instabilité du génome contribuent aux mécanismes pathologiques.
TLK2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TLK2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TLK2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TLK2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TLK2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.