Plasmide Double Nickase (m) TIRAP: sc-431178-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TIRAP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TIRAP Double Nickase (m) et le plasmide TIRAP Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tirap. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TIRAP | sc-431178-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) TIRAP | sc-431178-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Tirap** code **TIRAP** (également appelé **Mal**), une protéine adaptatrice qui couple la signalisation des récepteurs de type Toll (TLR) et de la famille des récepteurs de l’interleukine‑1 (IL‑1R) à l’activation en aval des voies **NF‑κB** et **MAPK**. TIRAP favorise le recrutement de **MYD88** vers des récepteurs tels que **TLR2** et **TLR4** à la membrane plasmique grâce à une localisation dépendante des phosphoinositides, orientant les premières étapes de la transduction du signal de l’immunité innée. En modulant l’induction de cytokines et de chimiokines, **Tirap** influence les réponses des macrophages et des cellules dendritiques, la polarisation inflammatoire et les interactions hôte–microbe. Une signalisation dépendante de TIRAP dérégulée est étudiée dans le contexte d’une inflammation aberrante et de pathologies immuno‑médiées, ce qui en fait un nœud utile pour disséquer les réseaux de signalisation des PRR.
TIRAP Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tirap dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tirap. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tirap. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tirap.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.