Plasmide CRISPR/Cas9 KO TIF1γ (h): sc-403230
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TIF1γ Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TIF1γ, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TIF1γ Antibody (XX-19): sc-101179
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TIF1γ (h) | sc-403230 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TRIM33 code pour TIF1γ, un régulateur transcriptionnel et une ligase E3 ubiquitine de la famille des protéines à motif tripartite (TRIM), qui intègre le contrôle de l’expression génique dépendant de la chromatine à la transduction des signaux. TIF1γ module la signalisation TGF-β/SMAD en régulant la disponibilité de SMAD4 et influence des programmes transcriptionnels spécifiques de lignée via des interactions avec des corépresseurs et la machinerie épigénétique. Il contribue également à la stabilité du génome et aux réponses aux dommages de l’ADN, reliant le contrôle transcriptionnel aux voies cellulaires de stress. Une activité dérégulée de TRIM33 a été associée à une différenciation altérée et à des contextes de signalisation oncogénique, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques en biologie du cancer et en régulation du développement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TIF1γ (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TRIM33 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TRIM33, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TRIM33 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TIF1γ.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TRIM33 pour l'étude de la signalisation de TIF1γ, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TRIM33 essentiels à la fonction de TIF1γ
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TRIM33 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TIF1γ plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TIF1γ plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TRIM33. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TIF1γ plasmide HDR (h) et le TIF1γ (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TRIM33 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TRIM33 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.